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    中文名：人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子（ECF）ELISA試劑盒

    別名：人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子（ECF）ELISA Kit

    規(guī)格：96T/48T

    保存：2-8℃

    經(jīng)營(yíng)種類：進(jìn)口分裝和原裝、國(guó)產(chǎn)。

    試劑盒成分：酶標(biāo)板，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等。

    樣本：血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。

    預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

    Elisa試劑盒特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好。

    Elisa試劑盒供應(yīng)種類：1.人Elisa試劑盒、2.動(dòng)物Elisa試劑盒、3.食品Elisa試劑盒、4.植物Elisa試劑盒、5.農(nóng)產(chǎn)Elisa試劑盒、6.微生物細(xì)胞Elisa試劑盒、7.其他各類Elisa試劑盒。

    應(yīng)用領(lǐng)域：僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷

    試驗(yàn)原理：

    ECF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）。已知ECF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將ECF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中ECF的濃度呈比例關(guān)系。

    人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子（ECF）ELISA試劑盒試劑準(zhǔn)備：

    試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

    1. 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶：試劑盒提供6管標(biāo)準(zhǔn)品，每管已標(biāo)定濃度，并且凍干。實(shí)驗(yàn)前在每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管中加入0.5mL樣本稀釋液，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)助其溶解，使其恢復(fù)為每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管身標(biāo)注的濃度。

    2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

   樣本處理及要求：

    1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

    2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

    3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

    4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

    5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

    6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

    7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

    人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子（ECF）ELISA檢測(cè)試劑盒操作時(shí)注意事項(xiàng)：

    1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同，務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作，否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性。

    2.若不同批號(hào)人ELISA試劑盒的不同組分（A液或酶工作液），或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用，有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高，花板等情形。

    3.反應(yīng)時(shí)間的誤差，做大量標(biāo)本時(shí)，*孔和zui后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。

    4.臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正常現(xiàn)象，任何試劑均不可避免?？梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。

    5.加樣時(shí)樣品量誤差，對(duì)于陰或很陽的標(biāo)本影響不大，但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響極大，建議校對(duì)加樣器。

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